辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)具有分子量小、標記方法簡單和性質(zhì)穩(wěn)定等優(yōu)點,是臨床檢驗試劑中一種常用的酶。該產(chǎn)品廣泛用于各類生化檢測項目及免疫類(ELISA)試劑盒。百靈威辣根過氧化物酶的底物種類非常豐富,可滿足不同的科研實驗需求。
■ HRP的發(fā)色底物
辣根過氧化物酶發(fā)色底物為過氧化物和供氫體(DH2),其真正底物是H2O2,但人們往往習慣把供氫體稱為底物或統(tǒng)稱供氫體底物。在ELISA中常用的供氫體有以下幾種:
1、OPD是ELISA技術(shù)中應用較多的供氫體,酶作用后顯黃色(最大吸收波長為492 nm),靈敏度高,測定方便。
2、TMB是近年來常用的一種供氫底物,經(jīng)酶作用后顯天藍色,目測對比度鮮明,加酸終止酶反應后變黃色(最大吸收波長為450 nm),易比色定量測定。
3、DBA供氫底物,其反應產(chǎn)物為不能溶解的棕色吩嗪衍生物,可用不同光鏡觀察。此種多聚物還能被還原和螯合四氯化碳,形成具有電子密度的產(chǎn)物,便于用電鏡觀察。
產(chǎn)品編號
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中文名稱
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英文名稱
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反應產(chǎn)物
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CAS
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包裝
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鄰苯二胺
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o-Phenylenediamine, OPD, 99.5%
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黃色、可溶性
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100 g
500 g
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3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺
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3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine, TMB, 99%
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藍色(黃色)、可溶性
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1 g
5 g
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3,3'-二氨基聯(lián)苯胺
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3,3'-Diaminobenzidine, DAB, 99%
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棕色、不溶性
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25 g
100 g
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聯(lián)苯胺
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Benzidine, 95%
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藍色、不溶性
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25 g
250 g
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四甲基聯(lián)苯胺硫酸鹽
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N-(3-Sulfopropyl)-3,3',5,5-tetramethylbenzidine,sodium salt, TMB-PS, 99%
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藍色、可溶性
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5 g
25 g
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5-氨基水楊酸
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5-Aminosalicylic acid, 98.5%
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棕色、可溶性
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25 g
100 g
500 g
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2,2'-二氮-雙(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)銨鹽
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Azinobis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid-2NH4-salt
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綠色、可溶性
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1 g
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3-氨基-9-乙基咔唑
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3-Amino-9-ethylcarbazole, AEC
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紅色、可溶性
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5 g
25 g
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4-氯-1萘酚
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Chloro-1-naphthol
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藍色、可溶性
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25 g
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※ 小貼士:氧化物、硫化物、氟化物及疊氮化物等可抑制HRP的活性,故勿用這類試劑作為防腐劑。
■ HRP的發(fā)光底物
魯米諾(3-氨基鄰苯二甲酰肼,Luminol)或其衍生物如異魯米諾(4-氨基鄰苯二甲酰肼,Isoluminol),是一類重要的發(fā)光試劑。用HRP標記抗體,進行免疫反應后,利用魯米諾作為發(fā)光底物,在HRP和起動發(fā)光試劑(NaOH+H2O2)作用下,魯米諾發(fā)光,發(fā)光強度依賴于酶免疫反應物中酶的濃度。反應過程如下圖所示:
產(chǎn)品編號
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中文名稱
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英文名稱
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CAS
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純度
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包裝
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魯米諾
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Luminol
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98%
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1 g
5 g
25 g
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分子式:C8H7N3O2
分子量:433.63
熔點:194-195℃
儲存條件: 2-8°C
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產(chǎn)品編號
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中文名稱
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英文名稱
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CAS號
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純度
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包裝
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異魯米諾
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Isoluminol
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98%
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1 g
10 g
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分子式:C8H7N3O2
分子量:177.16
熔點:194-195℃
儲存條件: 2-8°C
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■ 配套產(chǎn)品
產(chǎn)品編號
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中文名稱
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英文名稱
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CAS號
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純度
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包裝
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4-碘苯酚
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4-Iodophenol
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99%
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5 g
25 g
100 g
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四苯基硼酸鈉
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Sodium tetraphenylborate
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99.5%(ACS)
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25 g
100 g
500 g
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牛血清白蛋白
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Bovine serum albumin [ Fraction V], BSA
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——
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5 g
25 g
100 g
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十二烷基硫酸鈉
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Dodecyl sulfate sodium salt, SDS
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99%
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100 g
500 g
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脫氧膽酸鈉
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Sodium deoxycholate
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98%
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25 g
100 g
500 g
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苯甲基磺酰氟化物
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Phenylmethylsulfonyl fluoride, PMSF
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99%
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25 g
100 g
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亮抑酶肽
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Leupeptin
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96.5%
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10 mg
50 mg
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三(羥甲基)氨基甲烷鹽酸鹽
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Tris(hydroxymethyl)aminomethane hydrochloride, Tris-HCl
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99%
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25 g
100 g
500 g
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吐溫80
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Polysorbate 80
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——
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250 mL
1 L
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