百靈威是集研發(fā)、生產(chǎn)、經(jīng)營于一體的高科技化學公司,在歐洲和亞洲的制造基地裝備了 500mL-3000L 的反應釜,配套形成先進的柔性化學合成系統(tǒng),專門研發(fā)特殊化學品和新型中間體,能夠快速滿足由應用性試驗至工業(yè)化生產(chǎn)的個性化和系列化需求。
5,5'- 二硫雙(2- 硝基苯甲酸) 可作為測定蛋白質(zhì)、多肽組織中巰基的靈敏試劑;尿酸、膽固醇比色測定;有機磷農(nóng)藥中毒的監(jiān)測(膽堿酯酶測定)等。百靈威提供的DTNB,嚴格遵循質(zhì)量管理體系要求,品質(zhì)卓越;同時可穩(wěn)定提供克級至公斤級包裝,國內(nèi)現(xiàn)貨充足,全面滿足您科研生產(chǎn)不同需求。
◆產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品編號
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中文名稱
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英文名稱
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CAS
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包裝
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5,5'-二硫雙(2-硝基苯甲酸)
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5,5'-Dithiobis(2-nitrobenzoic acid) ;99%
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5g
25g
100g
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分子式:C 14H 8N 2O 8S 2
分子量:396.35
熔 點:243-245 ºC
性 狀:類白色或黃色粉末
溶解性:微溶于乙酸和水,溶于乙醇
儲存條件:密封于陰涼干燥處保存
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◆技術說明
DTNB 即Ellmann 試劑,用于比色法測定生物樣品中巰基,在巰基化合物的存在下,無色的DTNB 將被轉(zhuǎn)變成黃色的5- 巰基-2- 硝基苯甲酸,由于5- 巰基-2- 硝基苯甲酸在412 nm 處具有最大吸收,DTNB 的吸收光譜并不干擾巰基的測定。
其通用的配置方法為:
準確稱取0.198 g DTNB 用50 mM Na2HPO4(pH7.0)配制成50mL 溶液,存放于棕色瓶中,于暗處低溫保存?zhèn)溆?,應該注意的是配置、儲存時要避光。
以半胱氨酸中自由巰基的定量檢測方法為例,具體操作為:
1.試劑的配制:
① Tris-HCL 緩沖液(0.25 M):DDW 準確配制后,用鹽酸調(diào)節(jié)pH 8.3;
② 半胱氨酸標準溶液(1 mM):準確稱取0.017563g L- 半胱氨酸(175.63),用1 mL 甲酸溶解,以DDW 定容至100 mL;
③ DTNB(分子量:396.35)標準溶液(10 mM):準確稱取0.198175 g DTNB 用50mMNa2HPO4(pH=7.0)配制成50 mL 溶液,存放于棕色瓶中,于暗處低溫保存?zhèn)溆茫?br />
④ DTNB 分析溶液(0.1 mM):由1 體積10 mM DTNB 標準液加99 體積0.25 M 的Tris 緩沖液配制而成,現(xiàn)用現(xiàn)配。
2.標準曲線的制作:
① 25℃條件下,用Tris 緩沖液稀釋L- 半胱氨酸標準液,配成梯度的稀釋液(5.0 mL),其濃度分別為:0.00 mM、0.025 mM、0.05 mM、0.1 mM、0.15 mM、0.2 mM;
② 取上述各濃度溶液1mL 分別加入到5mL 預先恒溫于25℃水中的DTNB 分析溶液,搖勻,準確靜止10 min,立即于波長412 nm 處測定吸光度值(A),根據(jù)目的蛋白的吸光度在標準曲線上讀出對應的濃度即可。